糖果—還原糖的測(cè)定

1.直接滴定法

2 原理

樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，直接滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅液，以次甲基藍(lán)作指示劑，根據(jù)樣品液消耗體積，計(jì)算還原糖量。

3 試劑

3.1 堿性酒石酸銅甲液

稱取15g硫酸銅（CuSO4•5H2O）及0.05g次甲基藍(lán)，溶于水中并稀釋至1000mL。

3.2 堿性酒石酸銅乙液

稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶于水中，再加入4g亞鐵氰化鉀，*溶解后，用水稀釋至1000mL，貯存于橡膠塞玻璃瓶?jī)?nèi)。

3.3 乙酸鋅溶液

稱取21.9g乙酸鋅，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀釋至100mL。

3.4 亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）

稱取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至100mL。

3.5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（1mg/mL）

精密稱取1.000g經(jīng)過98～100℃干燥至恒量的純葡萄糖，加水溶解后加入5mL鹽酸，并以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1mg葡萄糖。

3.6 鹽酸

4 儀器

4.1 實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器和設(shè)備

4.2 古氏坩堝或G4垂融坩堝

5 操作步驟

5.1 樣品處理

將樣品搗碎混勻待用，樣品應(yīng)避免暴露在空氣和陽光下，并盡可能迅速地進(jìn)行分析。

稱取約2.5～5g樣品，置于250mL容量瓶中，加50mL水，搖勻后慢慢加入乙酸鋅溶液5mL及亞鐵氰化鉀溶液（10.6+89.4）5mL，加水至刻度，混勻。靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。

5.2 標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，同時(shí)平行操作三份，取其平均值，計(jì)算每10mL（甲、乙液各5mL）堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量（mg）。

5.3 樣品溶液預(yù)測(cè)

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以先快后慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時(shí)，以每?jī)擅?滴的速度滴定，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積。

5.4 樣品溶液測(cè)定 1

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預(yù)測(cè)體積少1mL的樣品溶液，使在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸繼續(xù)以每?jī)擅?滴的速度滴定，直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗體積。

6 結(jié)果計(jì)算

按下式計(jì)算糖果中還原糖的含量： 100100025021×××=VmmX

式中：X—樣品中還原糖的含量（以葡萄糖計(jì)），%；

m1—10mL堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各5mL）相當(dāng)于還原糖（以葡萄糖計(jì)）的質(zhì)量，mg；

m2—樣品質(zhì)量，g；

V—測(cè)定時(shí)平均消耗樣品溶液體積，mL。

7 精密度

同一樣品兩次平行測(cè)定值相對(duì)差不得超過15%。